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CCK-8試劑盒實(shí)驗(yàn)的操作步驟主要分為六步
點(diǎn)擊次數(shù):1070 更新時(shí)間:2021-12-21
  CCK-8試劑盒實(shí)驗(yàn)的操作步驟主要分為六步
  現(xiàn)代的科學(xué)技術(shù)是日新月異的,試驗(yàn)試劑產(chǎn)品也都在不斷的優(yōu)化和改善。ELISA試劑盒使用抗原抗體之間專一性結(jié)合的特性,對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)的試驗(yàn)辦法,經(jīng)過(guò)底物顯色深淺代表待測(cè)物在樣本中含量的多少。
  CCK-8試劑盒操作步驟:
  1、加標(biāo)準(zhǔn)品:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,依次加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50ul(建議每個(gè)濃度做2個(gè)平行孔)。
  2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
  3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  4、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
  5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  6、加酶:除空白孔外每孔加入酶標(biāo)試劑50μl。
  CCK-8試劑盒的注意事項(xiàng):
  1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
  3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  6、底物請(qǐng)避光保存。
  7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
  8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
  9、不同批號(hào)組分不得混用。

滬公網(wǎng)安備 31011802001678號(hào)

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