免费可以看的黄片欧美-欧美一级二级性色大片-九色精品欧美一区二区-欧美日韩国产大片欧美黄片

當(dāng)前位置:
首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
目錄導(dǎo)航 Directory
技術(shù)支持Article
表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
點(diǎn)擊次數(shù):1230 更新時(shí)間:2011-11-04

表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)含量。

實(shí)驗(yàn)原理:

  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人表皮生長(zhǎng)因子受體EGFR水平。用純化的人抗-EGFR抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的表皮生長(zhǎng)因子受體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)濃度。

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說(shuō)明書(shū)

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1個(gè)

1個(gè)

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品:9μg/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃保存

 

操作步驟

1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為6μg/L4μg/L ,2μg/L1μg/L,0.5μg/L)。

2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液50μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.         配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋后備用。

5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7.         溫育:操作同3。

8.         洗滌:操作同5。

9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.     測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

注意事項(xiàng):

1.  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.  濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.  各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4.  請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.  底物請(qǐng)避光保存。

7.  嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.  所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.  本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),   

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD     

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD      

代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

 

試劑盒性能:

1.樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。

2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%15%

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:2-8。

2.有效期:6個(gè)月

 

滬公網(wǎng)安備 31011802001678號(hào)

黄色国产精品一区二区三区| 麻豆最新出品国产精品| 久久午夜福利精品日韩| 亚洲国产四季欧美一区| 国产熟女高清一区二区| 高清不卡一卡二卡区在线| 国产精品丝袜一二三区| 色婷婷激情五月天丁香| 国产成人精品视频一区二区三区| 国产一区二区三区丝袜不卡 | 亚洲视频一级二级三级| 国产精品福利精品福利| 亚洲视频在线观看你懂的| 亚洲国产精品一区二区| 亚洲熟妇中文字幕五十路| 久久综合九色综合欧美| 麻豆一区二区三区精品视频| 国产伦精品一区二区三区精品视频| 国产免费黄片一区二区| 国产又粗又猛又爽又黄| 黄色片一区二区在线观看| 日本久久中文字幕免费| 激情五月天深爱丁香婷婷| 国产又大又猛又粗又长又爽| 亚洲天堂精品在线视频| 国自产拍偷拍福利精品图片| 久久机热频这里只精品| 我要看日本黄色小视频| 东京干男人都知道的天堂| 丰满少妇被猛烈撞击在线视频| 我的性感妹妹在线观看| 欧美人与动牲交a精品| 不卡免费成人日韩精品| 色一欲一性一乱—区二区三区| 91欧美日韩精品在线| 欧美日韩国产自拍亚洲| 国产成人在线一区二区三区| 一区二区三区日韩中文| 国产精品久久香蕉国产线 | 加勒比系列一区二区在线观看| 精品少妇一区二区三区四区|